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安捷伦液相色谱仪操作技巧与故障排除指南
更新时间:2025-09-22      阅读:139
 一、操作技巧
开机与初始化
电源与自检:依次打开计算机、色谱仪各模块电源,等待系统自检完成。若使用LabSolutions等软件,需双击图标进入系统并连接设备。
排气泡处理:在四元泵模块进行排气操作,确保流动相无气泡。若仪器具备瓶填充功能,需提前设置流动相体积,避免溶剂耗尽导致自动停机。
流动相更换:根据实验需求更换流动相,并充分冲洗系统。
方法编辑与参数设置
泵参数:在“Flow”中设置流速,在“Stop time”中设置运行时间,并通过“Timetable”编辑梯度洗脱程序。
进样器参数:在“Injection”中设置进样体积,并选择洗针方式。
柱温箱参数:设置控温模式,输入目标温度,确保色谱柱稳定性。
检测器参数:根据样品特性选择检测波长,并设置响应时间。
序列编辑与运行
序列创建:在软件中编辑序列,包含样品名称、位置、进样次数及调用方法。
自动关机设置:在序列参数中配置关机模式,确保序列完成后仪器自动关闭,避免长时间待机。
数据处理与报告生成
标准曲线建立:若已有曲线,另存方法并选择主方法模块;若需新建曲线,点击“校正-新建校正表”,输入保留时间及对应浓度。
报告输出:选择需打印的数据,右键发送至报告版面,选择模板输出结果。
二、故障排除
柱压异常
柱压高:
原因:缓冲液盐分沉积或样品污染。
解决:用40-50℃纯水低速正向冲洗柱子,待柱压下降后提高流速,再用常温纯水及甲醇冲洗。若为样品污染,反向冲洗柱子后依次用甲醇、甲醇+异丙醇、甲醇及纯水冲洗。
柱压低或无压力:
原因:误操作、漏液或泵不输液。
解决:检查泵状态及排空阀;用滤纸试漏确定漏液位置,拧紧接口或更换密封圈;若为溶剂入口过滤头堵塞,超声清洗或更换。
保留时间变动
原因:流动相组成变化、色谱柱老化、柱温波动或流速异常。
解决:复查系统设置,重新配制流动相;更换老化色谱柱;使用柱温箱稳定温度;检查泵密封圈及单向阀,必要时更换。
峰形异常
峰分叉:
原因:色谱柱污染或柱头填料塌陷。
解决:反向冲洗柱子后依次用甲醇、甲醇+异丙醇、甲醇及纯水冲洗;若填料塌陷,拧开柱头清理硬结部分,重新填充并压紧。
前沿峰或倒峰:
前沿峰原因:样品过载或溶剂选择不当。
解决:稀释样品或更换溶剂;若为色谱柱损坏,更换新柱。
倒峰原因:样品折射率低于流动相。
解决:使用与流动相相同的溶剂溶解样品,进样前平衡参比池。
基线漂移或噪音
原因:柱温波动、流动相不均匀或流通池污染。
解决:使用柱温箱控制温度;检查流动相配比及脱气情况;用甲醇或1N硝酸冲洗流通池。
无流量或流量异常
原因:系统堵塞、空气进入或泵密封件磨损。
解决:分段排查堵塞部位,超声清洗或更换;用玻璃针筒在泵出口处抽出空气;更换磨损密封件。
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